產(chǎn)品時間:2019-04-11
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383)公司一直腳踏實(shí)地,深耕市場,洞察廣大消費(fèi)者的需求,為消費(fèi)者提供高品質(zhì)產(chǎn)品而努力,一切從客戶需求出發(fā),為客戶需求打造專業(yè)的細(xì)胞產(chǎn)品,是我司能一直跑在市場前沿的秘訣所在,為回饋客戶,特展開8折優(yōu)惠溫暖沖擊波活動,盡情享受吧!
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383)
細(xì)胞介紹
NR8383(正常大鼠,1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細(xì)胞。細(xì)胞在gerbil肺細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了大約8-9個月。隨后,不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細(xì)胞克隆并亞克隆NR8383細(xì)胞,并三次用軟瓊脂亞克隆。細(xì)胞表現(xiàn)出巨噬細(xì)胞的特性,吞噬酵母多糖和銅綠,非特異性脂酶活性,F(xiàn)c受體,氧化降解;分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子。NR8383細(xì)胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TGF-0前體。在博萊霉素刺激下,TGF-(3mRNA表達(dá)也上升。細(xì)胞對內(nèi)毒素敏感。1-10鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達(dá)50%。即使達(dá)到0.001毫克/毫升的水平,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆NR8383細(xì)胞株提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細(xì)胞的均一來源,可以用于體外研究巨響細(xì)胞相關(guān)活性。
細(xì)胞特性
1)來源:肺;巨噬細(xì)胞
2)形態(tài):巨噬細(xì)胞,半懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383)細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約2-3h〇
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉秒娐?lián)。
細(xì)胞用途:僅供使用。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO),90%;胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培
養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹句,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。(該細(xì)胞建議使用*種方法,將所有細(xì)胞收集起來)
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管
中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(NR8383)注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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