小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗,往預(yù)先包被倉鼠組織蛋白酶捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成。顏色的深淺和樣品中的倉鼠組織蛋白酶呈正相關(guān),用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度,計算樣品濃度。
小鼠ELISA試劑盒的注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2.微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4.不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5.充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6.在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7.試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8.試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。