1、 血漿
用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標本,標本收集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
2、 細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)今日上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。
3、 細胞裂解液
1. 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用yimei消化細胞,加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省掉。
2. 收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預冷的PBS潤洗3次。
3. 參與適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前參與蛋白酶抑制劑)重懸細胞。一般6孔板一個孔的細胞量需求150~250μL PBS重懸。
4. 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結樣品,重復凍融幾回,使細胞充沛裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以抵達裂解的目的。
5. 4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。
4、 血清
血清是常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過一夜,使血清分出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的分出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。