如何選擇ELISA試劑盒
一、 原料及粗糙的試劑盒
表現(xiàn)在:準(zhǔn)確度不高,重復(fù)性不好。原因可能為抗體配對(duì)效果不是佳,抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞,包被抗體或檢測(cè)抗體雜蛋白較多,沒(méi)有純化或純化效果不好,影響檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測(cè)方法:
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子,稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入,看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2.對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說(shuō)明書(shū)上標(biāo)定的zui小濃度稀釋,可測(cè)出靈敏度,建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購(gòu)試劑盒的靈敏度是否如說(shuō)明書(shū)所述,也可判斷出所購(gòu)試劑盒是否有夸大之說(shuō)。
3.選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù),可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來(lái)說(shuō),板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒,可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測(cè),以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性,準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒,比較可靠的話,可作為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
二、檢測(cè)樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本中,除了細(xì)胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本,有些試劑盒對(duì)血清和血漿樣本的檢測(cè)效果不好,表現(xiàn)在光值偏低,如RF因子存在的話,光值偏高。
購(gòu)買產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)者如何分辨呢?
對(duì)說(shuō)明書(shū)上有說(shuō)能做血清血漿的試劑盒,如有緩沖液。建議如下:用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說(shuō)明書(shū)分別加樣,得出結(jié)果如差異過(guò)大,即可得知分析緩沖液的效果如何,是否確實(shí)有作用。
三、試劑盒的選購(gòu)方法
1.可以對(duì)常規(guī)品種的指標(biāo),因?yàn)樾枰枯^大,所以國(guó)內(nèi)公司會(huì)用心做,一般做的不錯(cuò),可以用國(guó)產(chǎn)的;對(duì)于不常用的指標(biāo),因?yàn)橛昧可伲瑖?guó)內(nèi)公司一般不做研,所以會(huì)用國(guó)外的。國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口盒子一起用,節(jié)省經(jīng)費(fèi)而且高性價(jià)比。
2.可以咨詢?cè)摴镜募夹g(shù)人員,看看是否專業(yè)。
3.對(duì)其公司要做一個(gè)了解,對(duì)新的公司還要謹(jǐn)慎考慮。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物科學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)儀器、研究試劑和實(shí)驗(yàn)室耗材,致力于向國(guó)內(nèi)外生物科學(xué)研究人員提供服務(wù)。專業(yè)生產(chǎn)廠家具有先進(jìn)水平的產(chǎn)品推薦給各類研究人員;另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開(kāi)發(fā),推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視,更多地側(cè)重于的投入。
以上是上海酶聯(lián)生物教你如何選擇ELISA試劑盒,您知道了嗎?