化學辦法的發(fā)展,首要源于生物化學、剖析化學等基礎(chǔ)研討及電子計算機等高新技能的發(fā)展?;瘜W已從曩昔的手藝滴定、化合物顏色反響進入一個全新的主動化微量剖析年代。首要運用的生化試劑技能有:
1. 主動剖析與酶法剖析
前30年,我們選用固定時刻測定酶活性,而近20年我們跨過了國外選用分光光度法接連監(jiān)測酶活性的手藝階段,而一步到位引入主動生化剖析儀選用動力學法接連監(jiān)測酶活性。新辦法的選用,使我們可剖析的酶范圍擴展,測定精確度和精密度提高,為供給更廣泛的信息;一起主動化剖析促進了酶法對代謝物測定的研討與使用,許多體內(nèi)的生化反響被模仿,曩昔選用強堿、強酸、火焰等比較激烈的化學反響應被摒棄,代之以溫文、方便、無污染的代謝物酶法測定。離子選擇電極的使用日益增多,并作為模塊組合參加主動化剖析。干化學剖析因為具有簡便、方便、精確的優(yōu)點,也在國內(nèi)的許多實驗室,特別是急診室廣泛選用。
2. 分子生物學技能
90年代,確診分子生物學在我國構(gòu)成?;瘜W范疇里除了對蛋白質(zhì)、代謝物等分子水平的研討外,選用分子生物學技能可以對某些遺傳病進行產(chǎn)前和出生后的基因確診,對代謝病和腫瘤進行基因變異和流行病學的調(diào)查和研討在此基礎(chǔ)上構(gòu)成了基因水平進行實驗確診的化學分支。
3. 免疫化學剖析
我國70年放射免疫剖析,建立了甲胎蛋白、人絨毛膜促性腺激素、胰島素的房免測定技能。近20年來,跟著免疫學研討的發(fā)展,特別是80年代單克隆抗體制備技能的廣泛使用,免疫濁度法、酶免疫、熒光免疫、發(fā)光免疫等主動化檢測技能迅速發(fā)展,免疫學學科與技能之間的穿插和相互滲透,使越來越多的化學查驗選用了免疫學技能,如apoA I,apoB等載脂蛋白的測定,脂蛋白(a)測定、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)質(zhì)量測定、肌紅蛋白、肌鈣蛋白、微量白蛋白、前白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α1-微球蛋白、銅藍蛋白等特種蛋白的測定,多種激素和醫(yī)治藥物的測定,均可選用免疫化學辦法。
4. 生化別離與剖析技能
近20年來生化剖析發(fā)展快速。光譜技能已從單一的比色法發(fā)展為選用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發(fā)射光譜法、分子熒光光譜法。別離技能除了一般的離心和超離心技能外,在層析和電泳技能方面有更廣泛的發(fā)展和使用。層析技能如薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜(HPLC)等使用液越來越廣泛,特別是HPLC以其快速、高分辨率在微量代謝物、藥物檢測方面更勝*。電泳技能中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的使用已顯著減少,瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAG)使用增多,目前已有主動電泳儀。等電聚膠電泳、毛細管電泳也在某些化學實驗室開展。跟著分子生物學的發(fā)展與核酸分子雜交技能的普及,作為手段的DNAPAG電泳與各種印跡技能已走入化學實驗室。