1)要留心避免出現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應顯色。
2)樣本的搜集及血清別離中要留心盡量避免細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)作非特異性煩擾。
3)血清標本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
4)冰凍保存的血清標本須留心避免因停電等構(gòu)成的重復凍融。ELISA試劑盒標本的重復凍融所發(fā)作的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)作損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留心,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。
5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。Elisa實驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診辦法。由于其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡潔,成果判別較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領(lǐng)域中。