準(zhǔn)確的應(yīng)用及保存血清,才能使血清施展應(yīng)有的效果。
1.應(yīng)用前處理:大部分血清在應(yīng)用前必需滅活處置,即560C30分鐘。滅活的目標(biāo)是去除血清中的補體身分,防止補體對細(xì)胞發(fā)生毒性感化。血清顛末滅活也會喪失一些對細(xì)胞無利的成分,如發(fā)展因子,是以也有人提出血清不經(jīng)滅活間接用于造就,這樣做的前提是確認(rèn)血清中不含補體身分。對付一些品德高的胎牛血清和新牛血清能夠斟酌不經(jīng)滅活間接用于細(xì)胞造就。
2.貯存條件:血清一樣平常貯存于一200C,同時應(yīng)防止重復(fù)凍融。購置大包裝的血清后,首先要滅活處置,而后分裝成小包裝,貯存于一20 0C,應(yīng)用前熔化。熔化時現(xiàn)置于4 0C。熔化后的血清在4 0C不宜長期寄存,應(yīng)盡快應(yīng)用。
3.應(yīng)用濃度:自從有了分解造就基,血清便是作為一種增加身分與分解造就基混雜應(yīng)用,應(yīng)用濃度一樣平常為5-20},罕用是10}。過量血清容易使造就中的細(xì)胞發(fā)生變更,特別是一些二倍體的無窮細(xì)胞系,敏捷發(fā)展以后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
4.選購血清時,先從供應(yīng)商處討取樣品停止實驗,選定一批后就要保存充足應(yīng)用6個月至1年的量,直至用另一批顛末事后實驗的樣品取代。